今天讓我們一起來(lái)了解一下abcam抗體防止降解、污染的方法，話不多說(shuō)一起來(lái)看看吧。
 

　　1、防止降解
 

　　抗體試劑稀釋至工作濃度后，建議及時(shí)使用，不建議對(duì)稀釋后的抗體進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間保存。如果必須保存，建議保存于4℃并于一周以內(nèi)使用。
 

　　一般而言，蛋白質(zhì)濃度高于1mg/ml時(shí)更不容易降解，因此部分抗體試劑中加入了牛血清白蛋白(BSA)作為蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑來(lái)防止降解。加入的蛋白質(zhì)還能盡可能減少抗體結(jié)合到容器壁上造成的損失。
 

　　需要注意的是，請(qǐng)勿向?qū)⒁M(jìn)行偶聯(lián)的抗體中加入蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑，因?yàn)榈鞍踪|(zhì)穩(wěn)定劑會(huì)與抗體競(jìng)爭(zhēng)，降低偶聯(lián)效率。
 

　　2、防止污染
 

　　為了防止微生物污染，可將*作為抗菌劑加入抗體工作液中，保持終濃度為0.02%(w/v)。Abcam的多款抗體中都含有*，濃度范圍為0.02%-0.05%?？贵w數(shù)據(jù)表的保存緩沖液部分對(duì)此有說(shuō)明。
 

　　此外，如果要對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行染色或處理，或進(jìn)行體內(nèi)研究時(shí)，請(qǐng)務(wù)必使用不含*的試劑。抗菌劑會(huì)阻斷細(xì)胞色素電子傳遞系統(tǒng)，對(duì)大部分生物體都有毒害作用。
 

　　高濃度的*會(huì)干擾涉及胺基的所有偶聯(lián)反應(yīng)，因此必須在進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)之前將其去除?；蚩蛇x用0.01%*(硫柳汞)，這種抗菌劑不含伯胺。
 

　　抗體溶液中的*可通過(guò)透析或凝膠過(guò)濾去除。IgG的分子量為150,000Da(IgM約為600,000Da)，*的分子量為65Da。截留分子量為14,000Da的微透析裝置可去除*。
 

　　透析過(guò)程在燒杯中(置于磁力攪拌器上，溫度保持4℃)進(jìn)行，每毫升抗體使用至少1升預(yù)冷的PBS，攪拌透析裝置6小時(shí)。更換PBS兩次，每次更換后均攪拌至少6小時(shí)。如有可能，所有材料都應(yīng)滅菌，并且應(yīng)在無(wú)菌條件下處理所得制備物。